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體外染色體畸變試劑盒(CA試驗(yàn))

簡要描述:體外染色體畸變試劑盒省去陽性底物成分準(zhǔn)備、誘導(dǎo) S9 制備,可以直接使用,大大縮短了實(shí)驗(yàn)周期;試劑盒各成分均經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量檢測,無雜菌污染,誘導(dǎo) S9 活性均符合染色體畸變試驗(yàn)要求,實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確、可靠、重現(xiàn)性高。染色體畸變試驗(yàn)試劑盒應(yīng)用廣泛,可進(jìn)行食品、化學(xué)品、農(nóng)藥、消毒劑、食品添加劑、藥物殘留、化妝品、容器與包裝材料等多個方面的遺傳毒理學(xué)檢測。

  • 產(chǎn)品型號:221011
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2024-01-02
  • 訪  問  量:4619

詳細(xì)介紹

品牌IPHASECAS
分子式純度
分子量貨號221011
規(guī)格5mL×20 體系/盒供貨周期現(xiàn)貨
主要用途遺傳毒性試驗(yàn),體外染色體畸變試驗(yàn)應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥

體外染色體畸變試驗(yàn)
體外染色體畸變試驗(yàn)的目的是檢測培養(yǎng)的哺乳動物細(xì)胞染色體結(jié)構(gòu)畸變。結(jié)構(gòu)畸變可份為染色體型和染色單體型。大多數(shù)化學(xué)致突變物誘導(dǎo)染色單體型突變,但染色體型突都也可發(fā)生。多倍體增加表明受試物可導(dǎo)致染色體數(shù)目畸變。但是,本方法不用于檢測數(shù)目畸變。染色體突變和相關(guān)事件可以引起很多人類遺傳性疾病,并且有證據(jù)表明,引起體胡魔癌基因和抑癌基因改變的染色體突變以及相關(guān)事件,與人類和實(shí)驗(yàn)動物的腫瘤發(fā)生有關(guān)。體外柴色體畸變試驗(yàn)可應(yīng)用于已建立的細(xì)胞系、細(xì)胞株或原代細(xì)胞培養(yǎng),根據(jù)培養(yǎng)生長能力、核型的穩(wěn)定性、染色體數(shù)目、染色體差異以及染色體響變的自發(fā)頻率選擇合適的細(xì)胞。

體外染色體畸變試劑盒
IPHASE in vitro mammalian chromosome aberration test kit (CHL)
北京匯智泰康醫(yī)藥技術(shù)有限公司針對染色體畸變試驗(yàn)開發(fā)染色體畸變試驗(yàn)試劑盒, 本試劑盒省去了陽性底物成分準(zhǔn)備、誘導(dǎo) S9 制備,可以直接使用,大大縮短了實(shí)驗(yàn)周期;試劑盒各成分均經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量檢測,無雜菌污染,誘導(dǎo) S9 活性均符合染色體畸變試驗(yàn)要求,實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確、可靠、重現(xiàn)性高。染色體畸變試驗(yàn)試劑盒應(yīng)用廣泛,可進(jìn)行食品、化學(xué)品、農(nóng)藥、消毒劑、食品添加劑、藥物殘留、化妝品、容器與包裝材料等多個方面的遺傳毒理學(xué)檢測。

體外染色體畸變試劑盒使用說明書
【試驗(yàn)原理】
   在加入和不加入代謝活化系統(tǒng)的條件下,使培養(yǎng)的哺乳類動物細(xì)胞暴露于受試物中,用中期分裂相阻斷劑秋水仙素進(jìn)行處理,使細(xì)胞停止在中期分裂相,隨后收獲細(xì)胞、制片、染色并分析受試物是否誘發(fā)體外培養(yǎng)的哺乳類細(xì)胞染色體畸變,從而評價受試物致突變的可能性。
【產(chǎn)品組成】

組分規(guī)格數(shù)量使用說明保存條件
S9復(fù)合物2mL1/-70℃
磷酸鹽緩沖液10 mL1使用前混勻
(CP)0.5 mL1800 μg/mL,使用前混勻
四列毒C(MMC)0.5mL220 μg/mL,使用前混勻
秋水仙素1.5 mL120 μg/mL,使用前混勻
中國倉鼠肺細(xì)胞(CHL)1 mL1/

【產(chǎn)品使用說明】
1、細(xì)胞復(fù)蘇
從-70冰箱取出細(xì)胞,于37℃水浴融化,1000rpm離心5min,棄上清,用含10%牛血清RPMI 1640培養(yǎng)液(RPMI-10)中重懸細(xì)胞;1000rpm再次離心5min,棄上清,用RPMI-10重懸后接種于細(xì)胞瓶中培養(yǎng)。
2、細(xì)胞準(zhǔn)備
將處于對數(shù)生長期,貼壁生長良好的CHL細(xì)胞用0.25 %( Trypsin-EDTA)消化處理制成細(xì)胞懸液,5 mL/瓶接種于25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶中,于37℃、5%二氧化碳培養(yǎng)箱中加濕培養(yǎng)約24 h-48h。
3、染毒處理
吸去培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液,加入一定濃度的受試物、S9混合液(不加S9混合液時,需用培養(yǎng)液補(bǔ)足)以及一定量不含血清的培養(yǎng)液,于培養(yǎng)箱中處理6h。在收獲細(xì)胞前4 h加入細(xì)胞分裂中期阻斷劑秋水仙素溶液(終濃度為0.2 mg/mL)。具體試驗(yàn)方案見下表:
1)S9混合液配制

S9混合液配制(10mL)
S9復(fù)合物1.6mL現(xiàn)配現(xiàn)用。使用過程中,于冰浴條件下保存。
           試驗(yàn)結(jié)束后,剩余溶液應(yīng)丟棄,不可重復(fù)使用。
磷酸鹽緩沖液8.4mL

2)推薦染毒培養(yǎng)體系配制方案(以3個受試物劑量組為例)

處理方式組別培養(yǎng)液體積(mL)S9混合液體積(mL)受試物體積(mL)溶劑體積(mL)陽性對照體積(mL)
CPMMC
活化陽性對照4.450.5//0.05/
劑量14.450.50.05///
劑量24.450.50.05///
劑量34.450.50.05///
溶劑對照4.450.5/0.05//
不活化陽性對照4.95////0.05
劑量14.95/0.05///
劑量24.95/0.05///
劑量34.95/0.05///
溶劑對照4.95//0.05//

注:24小時染毒所用陽性底物需稀釋2倍后加入0.05 mL。
4、收獲細(xì)胞及制片
用0.25%的溶液消化細(xì)胞,加入0.075mol/路化甲溶液進(jìn)行低滲處理,固定液(甲醇:斌戳酸=3:1)進(jìn)行固定并滴片,用吉姆薩染液染色,中性樹膠封片,并于油鏡下進(jìn)行閱片,記錄畸變細(xì)胞的坐標(biāo)位置及畸變類型,具體操作方法參照國標(biāo)方法進(jìn)行。
5、畸變類型分析及結(jié)果判定
結(jié)果分析及判定可參照:473 體外哺乳動物細(xì)胞染色體畸變試驗(yàn),《化學(xué)品測試方法·健康效應(yīng)卷》(第二版),2013年,(ISBN:978-7-5111-1476-1)。
【注意事項(xiàng)】
1.實(shí)驗(yàn)前請自行準(zhǔn)備RPMI 1640培養(yǎng)液、牛血清、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、24孔細(xì)胞培養(yǎng)板、滅菌槍頭、無菌移液管、二氧化碳培養(yǎng)箱、振蕩器、15、50mL離心管等,所有耗材需做無菌處理。
2.實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在符合細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)要求的環(huán)境下進(jìn)行。

匯智泰康是一家位于中美兩地的生物醫(yī)藥合同研發(fā)機(jī)構(gòu),整合中美兩地的藥物研發(fā)技術(shù)服務(wù)平臺,基于AAALAC、GLP、ISO/IEC 17025實(shí)驗(yàn)室認(rèn)證,面向很多企業(yè)及研發(fā)機(jī)構(gòu)提供分析化學(xué)、DMPK、藥理藥效、生物學(xué)、以及毒理安全性評價產(chǎn)品與服務(wù)。

主要產(chǎn)品:
體外藥物代謝產(chǎn)品
Ⅰ相代謝穩(wěn)定性試劑盒
Ⅱ相代謝穩(wěn)定性試劑盒
CYP450酶代謝表型研究試劑盒
不同種屬肝微粒體,肝S9
重組酶,標(biāo)準(zhǔn)品,孵育系統(tǒng)等

遺傳毒性產(chǎn)品
Ames試劑盒
體外染色體畸變試驗(yàn)試劑盒
TK基因突變試驗(yàn)試劑盒
HPGRT基因突變試劑盒
彗星試驗(yàn)試劑盒
誘導(dǎo)大鼠肝S9等

空白生物基質(zhì)
空白血清:食蟹猴,恒河猴,比格犬,大鼠,小鼠,豬,兔
空白血漿:食蟹猴,恒河猴,比格犬,大鼠,小鼠,豬,兔
空白血:食蟹猴,恒河猴,比格犬,大鼠,小鼠,豬,兔
空白尿液:食蟹猴,恒河猴,比格犬,大鼠,小鼠


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